全基因合成相关

• 1.密码子优化有必要吗？

  更新时间：2023-03-01

  有必要。不同来源的种属密码子的偏好性不同。比如，在人体内受偏爱的密码子对于E. coli来说可能是稀有的。百力格公司已经为国内外客户优化了大量的基因，有自主研发的专业软件。可免费为客户提供密码子优化服务。

• 2.百力格公司的标准免费克隆载体是什么？

  更新时间：2023-03-01

  (1) pUC系列（pUC18/pUC19/pUC57），pBuescript II SK(+l)，PCR2.1等载体：含有若干常用限制性内切酶识别序列；

  (2) pTG19-T 载体：适用于T/A克隆；另外，本公司还有近300种商业表达载体（如pET系列，pPIC系列）可供基因合成后克隆选择；

  若有特殊要求，需换到一些特殊载体或改造过的载体，为方便后续实验的及时进行，请提供载体及相关的载体信息。

• 3.收到的基因为什么质粒切不动，或切不全?

  更新时间：2023-03-01

  可能原因如下：

  (1)质粒上酶识别序列不正确或者没有；

  (2)酶切反应条件不合适

  (3)限制性内切酶对DNA甲基化敏感；

  (4)内切酶稀释不正确或加入方法不正确；

  (5)甘油浓度过高；

  (6) 限制性内切酶已部分或全部失活；

  (7)保护碱基引入导致侧翼链锁死酶切位点。

  
  

  对策：

  (1)检查质粒DNA中是否存在可被限制酶识别的DNA序列。

  (2)优化酶反应体系，使用随酶提供的反应缓冲液；增大酶量或更换新酶。

  (3)检查DNA是否已被甲基化，所用的酶是否对甲基化敏感。

  (4) 更换保护碱基，或PCR扩增目的片段，酶切PCR产物。

• 4.如何运输以及保存质粒及其菌株？

  更新时间：2023-03-01

  我们为您提供含有完全正确的基因序列的质粒（不少于5ug）两管。质粒可常温运输，溶解后需－20℃保存，并尽量避免反复冻融。

• 5.客户提供样品做相关服务时，送样要求有哪些？

  更新时间：2023-03-01

  质粒样品，可以是穿刺菌、甘油菌、冻干质粒或质粒溶液等形式。

  
  

  1)穿刺菌：请提供穿刺培养的单克隆菌落。穿刺培养的菌可以长时间保存而不会导致质粒的拷贝数明显下降。样品请在1.5ml或2ml的Eppendorf管中加入相应抗生素的固体LB培养基，然后将单菌落用牙签穿刺于LB固体培养基中。

  2)菌液：请将过夜培养的菌液加灭菌甘油至终浓度20%保存于1.5ml或2ml的Eppendorf管中，注意封口，以免污染。

  3)质粒：请提供3-5ug溶于无菌去离子水的质粒溶液或者抽干质粒。

  4)注意：

   a. 请将装有样品的Eppendorf 管口用封口膜封紧，防止运输途中开盖导致样品污染或者丢失。

   b. 请在管壁上注明质粒名称及抗性。

   c. 载体其他信息请以邮件或便签等形式告知。